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精宏恒溫水浴鍋對(duì)煙酸的體外抗氧化活性的觀察

返回列表 來(lái)源:未知 發(fā)布日期:2019-07-05 14:14【

隨著我國(guó)經(jīng)濟(jì)和飼料工業(yè)的迅速發(fā)展,各類飼料及食品添加劑的 使用也日益增加。煙酸(niacin),屬于 B 族維生素,是機(jī)體維持生 理功能的必須營(yíng)養(yǎng)素。除了作為機(jī)體必須的營(yíng)養(yǎng)素外,煙酸具有全 面的調(diào)血脂作用,而近年來(lái)煙酸作為營(yíng)養(yǎng)藥物、食品及家畜飼料添加 劑中的主要成分更是受到廣泛的關(guān)注。煙酸的營(yíng)養(yǎng)支持及機(jī)體代謝 調(diào)節(jié)作用基礎(chǔ)目前尚未完全揭示,其是否具有抗氧化活性目前研究甚 少。本文以煙酸為研究對(duì)象,研究其體外抗氧化活性,以期為飼料及 食品添加劑煙酸的營(yíng)養(yǎng)支持作用提供一定的理論基礎(chǔ)和依據(jù)。



1 儀器與材料

1.1 儀器   


752型紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)(上海光譜儀器有限公司); Secura324-1CN精密天平德國(guó)賽多利斯分析天平);恒溫水浴鍋(上海精宏實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司)。



1.2 材料   

煙酸(NA)、1,1- 二苯基苦基苯肼(DPPH)、1,10- 菲羅啉均購(gòu) 自美國(guó) Sigma-Aldrich 公司;L- 抗壞血酸(維生素 C)、H2O2、硫酸亞 鐵、乙醇、硫代巴比妥酸、三氯乙酸均為分析純。



2 方法

2.1 煙酸對(duì)羥基自由基清除能力的測(cè)定   


取 2.1mM1,10- 菲羅啉溶液 1mL 置入試管中,加入 2mL 磷酸鹽緩 沖溶液(PBS)和 1mL 雙蒸水混勻,再加入 1mL 硫酸亞鐵溶液混勻, 最后加入1mL H2O2溶液,37℃溫育60min,在536nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度, 為A(損);用1mL蒸餾水代替H2O2,測(cè)的吸光度值為未損傷管A(未); 用不同濃度樣品溶液代替雙蒸水,測(cè)出的吸光度為 A(樣)。   清除率(%)=[A(樣)-A(損)]/[A(未)-A(損)]×100



2.2 煙酸對(duì) DPPH 自由基清除能力的測(cè)定   

取不同濃度樣品溶液 2mL 和 DPPH• 溶液 2mL 加入到試管中搖勻、 室溫靜置 30min,在 517nm 波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度值 Ai ;在 2mL DPPH• 標(biāo)準(zhǔn)溶液中加入 2mL 無(wú)水乙醇,震蕩混合,在 517nm 波長(zhǎng)處測(cè)定吸 光度值 A0;試管中加入 2mL 不同濃度的樣品溶液和 2mL 無(wú)水乙醇, 搖勻、避光放置 30min 后,在 517nm 波長(zhǎng)處測(cè)定吸光值 Aj 。   清除率(%)=[1-(Ai -Aj )/A0]×100%



2.3 煙酸對(duì)脂質(zhì)過(guò)氧化物抑制作用的測(cè)定   

新鮮雞蛋去卵清,卵黃用等體積的 PBS 緩沖液配制成 1:1 的卵黃 懸液,同方向勻速攪拌 10min,再用 PBS 稀釋成 1:25 的卵黃懸液。吸 取卵黃懸液 0.2mL,分別加入 0.1mL 不同濃度樣品溶液,0.2mL 25mM 硫酸亞鐵溶液,加入 1.5mL PBS 緩沖液,在 37℃水浴下反應(yīng) 30min, 加 1mL 20% 三氯乙酸,混勻 3500r/min 離心 15min,取上清液 2mL, 加 1mL 0.8% 硫代巴比妥酸溶液,沸水浴 15min 冷卻后 532nm 下測(cè)定 吸光度值,以 0.1mL 蒸餾水代替樣品作為空白對(duì)照管。   清除率 =(A0-A)/A0×100%   其中,A0 為空白對(duì)照管吸光度,A 為樣品吸光度。



2.4 煙酸還原鐵離子能力的測(cè)定   

在試管中加入 0.5mL 樣品溶液,2.5mL 的 PBS 緩沖液和 2.5mL 鐵 氰化鉀溶液,震蕩均勻,50℃水浴 20min,流水冷卻,然后加入 2.5mL三氯乙酸溶液。混勻后,用 3000r/min 離心 10min。吸取上清液 2.5mL 置于新的離心管中,再加入 2.5mL 蒸餾水和 0.5mL 三氯化鐵溶液,混 合均勻后,用紫外分光光度計(jì)在 700nm 波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度。



3 結(jié)果

3.1 煙酸對(duì)羥基自由基清除的影響   


機(jī)體過(guò)量的自由基則會(huì)引起蛋白質(zhì)變性、酶失活、多糖降解、 DNA 鏈斷裂、生物膜結(jié)構(gòu)損傷、細(xì)胞解體乃至機(jī)體病變和死亡。從 圖1結(jié)果可知,隨著煙酸濃度增加,其對(duì)羥基自由基的清除率逐漸增大。 當(dāng)煙酸濃度為 0.5mg/mL 時(shí),羥基自由基清除率為 21.83%,表明煙酸 具有一定的清除羥基自由基的作用。





3.2 煙酸對(duì) DPPH 自由基清除的影響   


DPPH 自由基溶液在 517nm 處有強(qiáng)吸收,每個(gè) DPPH 分子在溶液 中可生成一個(gè)穩(wěn)定的含氮自由基,當(dāng)它與提供 1 個(gè)電子的自由基清除 劑作用時(shí),生成無(wú)色產(chǎn)物使溶液的典型紫色變淺。圖 2 表明,隨著煙 酸濃度的增加,其對(duì) DPPH 自由基的清除率增大,揭示煙酸具有一定 的體外抗氧化活性。




3.3 煙酸對(duì)脂質(zhì)過(guò)氧化物抑制作用的影響   


隨著煙酸濃度的增加,煙酸對(duì)卵黃脂蛋白體系中脂質(zhì)過(guò)氧化作用 抑制率也隨之增加,其抑制作用與煙酸濃度呈現(xiàn)一定的量效關(guān)系。煙酸對(duì)卵黃脂蛋白脂質(zhì)過(guò)氧化物有較好的抑制作用,最大抑 制率為 61.02%。



4 結(jié)論   

旋壓成型技術(shù)作為金屬回轉(zhuǎn)體加工中新興的一種特種成型技術(shù), 自產(chǎn)生以來(lái),已經(jīng)做了大量的理論研究工作,應(yīng)用也日益廣泛,但 對(duì)旋壓超薄壁件的研究相對(duì)甚少,尚沒(méi)有形成較為全面、系統(tǒng)、可靠 的超薄壁旋壓基礎(chǔ)理論及質(zhì)量控制體系給予技術(shù)支持。上述深筒薄壁 銅零件的旋壓成型工藝對(duì)類似深筒薄壁零件旋壓提供了很好的借鑒作 用。在實(shí)際加工中,還需要通過(guò)不斷的試驗(yàn)和積累,才能選出合適的 加工方案,旋壓加工出合格的產(chǎn)品。

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